Clean up 純化

Ludger 提供多種產品,用於酵素消化和分子標記後進行聚醣捕獲和純化。利用高特異性模具純化聚醣,易於後續分析。

醣基化作用是真核生物將蛋白轉譯後修飾的重要環節,醣鏈對於蛋白質的結構和功能具有重要的影響,例如:細胞附著、胞內移位或病原菌感染等,藉由剖析醣蛋白的醣基組成也可以進一步了解:

  • 細胞識別、分化
  • 信息傳導
  • 免疫應答
  • 疾病研究(神經退化、感染、腸道)
  • 藥物研究
  • 癌症研究

Workflow:

Purification 純化

將醣蛋白進行聚糖釋放後,需要精確的純化步驟以便後續分析。Ludger 提供針對各種聚醣的純化套組,無需手動真空、再現性高,純化後分析訊號更為明確。

示意圖

產品描述

Glycan Purification 聚醣純化

EC50 Cartridges

  • 純化所有N- 和O- 聚醣
  • 不適用於結構單純的單醣或雙醣

EB10 Cartridges

  • 純化所有N- 和O- 聚醣
  • 不適用於結構單純的單醣或雙醣

CEX Cartridges

  • 純化所有O- 聚醣

Glycan Cleanup After Labeling Reactions 聚醣標記後純化

S Cartridges

  • 純化已標記的N-和O-聚醣(2-AB、2-AA)
  • 常用於生物製藥 FDA\EMA的醣譜分析QC

T1 Cartridges

  • 已經過ICH Q2驗證,精密度和再現性 CV值<3%
  • 可純化已標記的N-和O-聚醣(2-AB、2-AA和APTS)
  • 適用於高通量純化且速度快

A Cartridges

  • 純化被標記後的N-聚醣(2-AB、2-AA、APTS和V-tag)
  • 常用於生物製藥的醣譜分析

Vacuum manifold system 真空純化系統

PBM 96-well Clean-up Plates

  • 去除外切或內切醣苷酶
  • 需使用真空歧管系統(Ludger LV system)或離心機(96 well rotor)

Procainamide clean-up plate

  • 用於去除多餘的 procainamide 標記
  • 需使用真空歧管系統(Ludger LV system)

Pre-Permethylation clean-up plate

  • 全甲基化前進行N-聚醣富集
  • 需使用真空歧管系統(Ludger LV system)

96-well Post-Exoglycosidase clean-up plate

  • 去除多餘的外切醣苷酶
  • 需使用真空歧管系統(Ludger LV system)或離心機(96well rotor)

Post-Exoglycosidase clean-up spin columns

  • 去除多餘的外切醣苷酶
  • 適用於任何可裝載eppendorf的離心機

應用分享

疾病研究

2020 Nature Communication

Prominent members of the human gut microbiota express endo-acting O-glycanases to initiate mucin breakdown.

  • 腸道微生物會利用黏蛋白作為營養來源,作者分析微生物的代謝機制可更好地解影響人類消化系統相關疾病的潛在治療措施。
  • 結果顯示內切 O- 聚醣酶於腸道內的作用機制,並於潰瘍性結腸炎組織和結直腸癌細胞產生的黏蛋白發現顯著的寡醣差異,表示具有發展為診斷腸道疾病的檢測工具。

癌症研究

2018 Journal of Allergy and Clinical Immunology

Engineering and stable production of recombinant IgE for cancer immunotherapy and AllergoOncology.

  • AllergoOncology 是癌症免疫學的新興學科,旨在利用過敏相關免疫的特徵來治療腫瘤。作者開發一種可以穩定表達重組IgE 的方法,以應用於癌症治療。
  • 不同培養基會影響細胞分泌抗體的品質,包括轉譯後修飾。作者檢測不同濃度的培養基表達的重組 IgE 需進行聚醣分析,以了解其結構及功能性。

參考資料

  • Crouch, L.I., Liberato, M.V., Urbanowicz, P.A. et al. Prominent members of the human gut microbiota express endo-acting O-glycanases to initiate mucin breakdown. Nat Commun 11, 4017 (2020). https://doi.org/10.1038/s41467-020-17847-5
  • Crescioli, S., Chiaruttini, G., Mele, S., Ilieva, K. M., Pellizzari, G., Spencer, D., Gardner, R. A., Lacy, K. E., Spicer, J. F., Tutt, A., Wagner, G. K., & Karagiannis, S. N. (2018). Engineering and stable production of recombinant IgE for cancer immunotherapy and AllergoOncology. The Journal of allergy and clinical immunology, 141(4), 1519–1523.e9. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2017.12.986