Mabtech ELISpot IFN gamma

前言

a. 高靈敏度的免疫試劑

為了不浪費珍貴的實驗動物樣本並發揮其最大的價值，應選擇高靈敏、高精準度的免疫試劑來進行分析，以提高實驗的準確性與可信度。而 ELISpot 從單細胞層面進行分析，可在數十萬顆細胞中檢測單顆細胞的免疫反應。

b. Mabtech 免疫試劑適用不同物種的動物模型

Mabtech 提供不同物種的 IFN-γ ELISpot 試劑，包含：雪貂、倉鼠、土撥鼠等，可分析特定人類疾病動物模型的免疫反應，有助於藥物或疫苗的研發。

c. 為什麼分析 IFN-γ ?

IFN-γ 為一種促炎細胞因子，主要由活化的 T 細胞和 NK 細胞所分泌。 IFN-γ 可激活巨噬細胞和內皮細胞，也可影響 T 細胞、B 細胞與抗原呈現細胞 (APC) 以調節免疫反應。輔助型 T 細胞和胞殺型 T 細胞所分泌的 IFN-γ 為 TH1 表型的重要標誌，故高水平的 IFN-γ 通常與宿主對病原體的有效防禦相關。

選擇合適的動物模型

選擇實驗動物時應優先考慮動物物種的進化程度，且盡可能選擇結構、功能、代謝與人類相近的動物進行實驗。研究者在選擇實驗動物前，除了充分瞭解實驗動物的生物學特徵，其在感染人類疾病時可否產生相似的病徵也需要進一步瞭解，以避免資源的浪費[1]。

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應用實例

a-1. 雪貂 Ferret 與流感

雪貂感染流感後產生的臨床病徵、病理現象及免疫反應與人類非常相似，是到目前為止被認為是對流感病毒反應最佳、研究人類流感病毒最理想的小型動物模式[2]。

Koen van de Ven等人在文中提到，雖然最常以小鼠模型研究 T 細胞反應，但小鼠不會表現出流感的傳統疾病症狀（發燒、打噴嚏等），且不易感染人流感病毒。相比之下，雪貂更適合作為流感研究用的動物模型，不僅可改善小鼠和人類研究間的差距，更促進流感疫苗的開發。

下圖為作者利用 MabTech Ferret IFN-γ ELISpot 分析雪貂感染不同流感病毒亞型後的 T 細胞免疫反應[3] 。

Mabtech ELISpot Ferret

a-2. 雪貂 Ferret 與SFTS　

雪貂除了可用於流感病毒的研究外，Kwak, JE 等人在開發發熱伴血小板減少綜合症(SFTS) 的DNA疫苗時，以老年雪貂作為動物模型，模擬人類感染 SFTSV 的臨床病徵，例如嚴重的血小板減少症、白血球減少、高燒和高死亡率。

下圖為使用MabTech Ferrets IFN-γ ELISpot 分析雪貂施打疫苗後的特異性 T 細胞的免疫反應[4]。

Mabtech ELISpot Ferret 1

b. 倉鼠 Hamsters 與 COVID-19

新型冠狀病毒透過表面的S蛋白與人類受體ACE2結合進而感染人體，雖然恆河猴與絨猴和人類最相似，但以非人類靈長類動物進行研究，所需的資金及環境要求相當嚴格。

港大醫學院陳福和助理教授團隊發現金黃敘利亞倉鼠 (Golden Syrian Hamster)的ACE2與人類僅差4個氨基酸，並且可被 SARS-CoV-2感染，可作為模擬人體感染進程的動物模型 [5]。

近期國衛院研發新冠肺炎(COVID-19) DNA疫苗，以倉鼠進行疫苗免疫效力試驗，觀察倉鼠施打疫苗後，對於新冠病毒的感染是否具有保護力[6]。

c. 土撥鼠 Woodchuck 與 B型肝炎

全球有將近三億五千萬人為慢性 B 型肝炎病毒帶原者，其中每年大約有一百萬人死於併發症，為十大死因之一。土撥鼠對於土撥鼠肝炎病毒(Woodchuck hepatitis virus; WHV)具有感受性，此病毒與人類 B 型肝炎病毒的基因結構和複製機轉相近，而土撥鼠感染WHV病毒後也會發展成肝癌。因此，將土撥鼠作為研究人類 B 型肝炎病毒及病毒誘發肝細胞癌的自發性動物模型[7]。台大吳慧琳研究團隊於2010年以土撥鼠肝癌動物模型，進行基因治療後土撥鼠肝腫瘤大幅縮小80-90%[8]。

 

 

參考資料

  1. https://www.itsfun.com.tw/%E5%AF%A6%E9%A9%97%E5%8B%95%E7%89%A9/wiki-1093986-7000866#%E5%9C%8B%E9%9A%9B%E8%A6%8F%E7%AF%84

  2. https://www.cdc.gov.tw/En/File/Get?q=8WuVM0eNDWdgVwB5E9JbuU_-hb18V9eM4DvVhxsApcDrA6Up5-gjpXOB4aC3k2or6KqLaSz_DCIoiPF3XRnBhWgsvPLlnzgRAe36Dd6zb2x9Ur3ru9N6DEZP_tgZeauW

  3. van de Ven, K., de Heij, F., van Dijken, H. et al. Systemic and respiratory T-cells induced by seasonal H1N1 influenza protect against pandemic H2N2 in ferrets. Commun Biol 3, 564 (2020).

  4. Kwak, JE., Kim, YI., Park, SJ. et al. Development of a SFTSV DNA vaccine that confers complete protection against lethal infection in ferrets. Nat Commun 10, 3836 (2019).

  5. Sia S.F. et al. Pathogenesis and transmission of SARS-CoV-2 in golden hamsters. Nature 583, 834–838 (2020)

  6. https://www.mohw.gov.tw/cp-4628-55156-1.html

  7. Lanford, R.E., Chavez, D., Brasky, K., Burns, R., and Rico-Hesse, R. Isolation of a newhepadnavirus from the woolly monkey, a New World primate. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 5757-5761. (1998).

  8. Wu, H.-L., et al (2010). Combining antiangiogenic therapy with immunotherapy exerts better therapeutical effects on large tumors in a woodchuck hepatoma model. Proceedings of the National Academy of Sciences, 107(33), 14769–14774.